第 23 单元

分离与色谱

真实样品几乎都是混合物:先分开,才能测准。这一单元从分液漏斗里的分配平衡出发,理解为什么“少量多次”萃取更彻底、pH 如何决定酸和碱去哪一层;再把一次次萃取串成色谱柱,学习保留因子、选择性、塔板高度和分离度;最后操作气相与液相色谱的模拟器,并用内标法测定血液中的乙醇。

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  1. 1 萃取:分配平衡与分液漏斗 碘在水里是棕黄色,一摇正己烷就变成紫色跑到上层。分配系数告诉你每次能带走多少,为什么少量多次更彻底,以及怎样用 pH 让酸或碱换一层。 25 分钟
  2. 2 色谱原理:保留、选择性与 Rf 把萃取重复成百上千次,就是色谱。分子在流动相与固定相之间来回分配,走得快慢由保留因子 k 决定;在薄层板上分离叶片色素,读出 Rf。 25 分钟
  3. 3 柱效:塔板、峰展宽与分离度 谱带在柱中一边走一边变宽。塔板高度、范第姆特曲线和分离度方程告诉你:柱子加长一倍,分离度只提高 41 %,而改变选择性往往事半功倍。 30 分钟
  4. 4 气相色谱与高效液相色谱 柱温、载气、固定相、流动相组成和梯度——在模拟器上把五种溶剂和一组防腐剂分开,再用内标法由峰面积测定血液中的乙醇。 35 分钟
  5. 5 毛细管电泳 没有固定相,只有电场:离子按淌度在细管中赛跑。淌度和扩散系数都能由离子电导率算出,电渗流把所有东西推向检测窗,几十万块理论塔板让性质极近的离子也能分开。 25 分钟