奎宁荧光的氯离子猝灭
用脉冲激光激发酸性奎宁溶液，记录荧光衰减，拟合出寿命；换几种氯离子浓度，从施特恩–福尔默图求出猝灭速率常数，并与扩散控制极限比较。
实验目的 测定奎宁在 0.5 M 硫酸中的荧光寿命和氯离子的双分子猝灭速率常数，并判断猝灭是动态的还是静态的。
操作步骤
- 选 0 mM 的样品，点“发射激光并拟合”。在对数坐标下，衰减的尾部是一条直线，斜率给出寿命 τ₀。
- 依次测 5、10、20、30、40、50、60 mM 氯离子的样品，每次都记录拟合的寿命。
- 看施特恩–福尔默图：1/τ 对 [Cl⁻] 的斜率是 k_q，截距是 1/τ₀。算出 K_SV = k_q τ₀。
- 把 k_q 与紫色带（扩散控制极限 8RT/3η）比较：几乎每次碰撞都猝灭吗？
- 切换到“假想配合物”再测一遍，比较寿命和稳态荧光的变化，说明氯离子属于哪种猝灭。
注意观察
- 不加氯离子时寿命约 20 ns；60 mM 氯离子使寿命缩短到约 3 ns。
- 1/τ 对 [Cl⁻] 是直线，斜率约 5 × 10⁹ M⁻¹ s⁻¹，接近而略低于扩散控制极限。
- 对假想的配合物，荧光变暗而寿命不变——与氯离子的实际行为相反。
真实实验室
- 氮分子激光器和光电倍增管都用千伏级高压电源；激光是看不见的紫外光，全程戴防紫外护目镜，光路封闭在无反射的挡板里。
- 仪器响应约 2.5 ns，很快的衰减会被它拉宽：寿命只有几纳秒时，要把指数衰减与仪器响应卷积后再拟合。
- 奎宁在酸中稳定一年以上，荧光也不被溶解氧猝灭，所以样品不必除氧；硫酸储备液浓度较高，溅到皮肤上要尽快冲洗。